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動(dòng)物日糧中添加抗生素具有顯著的促生長和抗病效果。所以在飼料中添加抗生素的做法在我國十分普遍。然而，飼料中添加抗生素的危害日益顯現(xiàn)，并受到社會(huì)的廣泛關(guān)注，禁用抗生素成為社會(huì)安全的需要，并將成為一種養(yǎng)殖規(guī)范［1］。越來越多的研究者注意到，在現(xiàn)代養(yǎng)殖條件下，研究盡早建立和維持動(dòng)物腸道的菌群平衡的有效措施是取代抗生素的可行途徑。微生態(tài)制劑具有無毒、無殘留、無副作用、安全可靠、不污染環(huán)境等特點(diǎn)，其開發(fā)及利用越來越受到各國的重視。仔豬斷奶是豬生長發(fā)育過程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，剛斷奶的仔豬首先面臨的就是環(huán)境和飼料的改變，仔豬通常表現(xiàn)為食欲差、易腹瀉、生長緩慢、成活率低，這些問題始終困擾著集約化養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。在斷奶前后，合理利用微生態(tài)制劑，可以有效地預(yù)防和治療仔豬腹瀉，降低治療費(fèi)用，不產(chǎn)生耐藥和肉品藥物殘留，還可以減少應(yīng)激的發(fā)生，有利于仔豬的生長。微生態(tài)制劑具有調(diào)控動(dòng)物腸道微生物平衡、增殖有益菌、抑制有害菌、降低腸道pH值、提高消化道酶的活性、提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率和提高動(dòng)物機(jī)體免疫力等方面的作用和功能［2］。近年來，國內(nèi)外學(xué)者在微生態(tài)制劑對(duì)畜禽免疫機(jī)能和腸道菌群調(diào)節(jié)等方面進(jìn)行了廣泛的研究。易力等［3］研究表明，添加微生態(tài)制劑組的禽類其胸腺、脾臟、法氏囊指數(shù)都大于對(duì)照組，說明微生態(tài)制劑對(duì)雞胸腺、脾臟、法氏囊的發(fā)育均有促進(jìn)作用。于卓騰等［4］研究發(fā)現(xiàn)，在20和27日齡肉雞日糧中添加益生素和合生素，DGGE圖譜的條帶數(shù)和多樣性均顯著增加，說明益生素和合生素可促進(jìn)肉雞腸道內(nèi)菌群的增殖。肽菌素是山東寶來利來生物工程股份有限公司生產(chǎn)的微生態(tài)制劑產(chǎn)品，其生產(chǎn)的菌株主要是乳酸菌、酵母菌和芽胞桿菌等。該試驗(yàn)旨在研究肽菌素在斷奶仔豬上的應(yīng)用效果，以期為肽菌素在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。   1材料與方法   1.1試驗(yàn)材料   肽菌素由植物乳桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母和枯草芽胞桿菌及其代謝產(chǎn)物等組成，其活菌總數(shù)不低于5.0×108cfu/g；仔豬由山東寶來利來巴夫巴夫農(nóng)業(yè)科技有限公司提供；斷奶仔豬料由亞太中慧集團(tuán)提供，為粉料，基礎(chǔ)飼料配方為（%）：玉米59.8，膨化豆粕28.0，進(jìn)口魚粉4.0，乳清粉4.0，磷酸氫鈣0.8，預(yù)混料1.0，植物油1.0，石粉1.2，食鹽0.2；營養(yǎng)水平為：消化能1380.8kJ/kg，粗蛋白20.2%，賴氨酸1.1%，蛋氨酸+胱氨酸0.701%，色氨酸0.269%，鈣0.8%，磷0.65%。常規(guī)飼糧中未使用抗菌藥物。   1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理   選用健康的28日齡定遠(yuǎn)黑斷奶仔豬45頭進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。按體重相近、性別比一致的原則隨機(jī)分成3組，即對(duì)照組（喂基礎(chǔ)飼料）、試驗(yàn)組1（基礎(chǔ)飼料+0.1%肽菌素）和試驗(yàn)組2（基礎(chǔ)飼料+0.2%肽菌素），每組15頭，分成3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5頭。試驗(yàn)期為21d。仔豬以自由采食、飲水等常規(guī)方法進(jìn)行飼養(yǎng)，按常規(guī)免疫程序進(jìn)行疾病預(yù)防及飼養(yǎng)管理。   1.3樣品采集及測(cè)定指標(biāo)   1.3.1生長性能的測(cè)定：試驗(yàn)開始及結(jié)束時(shí)，對(duì)仔豬逐只進(jìn)行空腹稱重，詳細(xì)記錄各組采食量，計(jì)算各處理組的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料肉比（F/G）。   1.3.2腹瀉率的測(cè)定：在試驗(yàn)周期內(nèi)，詳細(xì)記錄各組仔豬腹瀉情況，計(jì)算腹瀉率，計(jì)算公式如下：腹瀉率=［該圈日腹瀉仔豬頭數(shù)總和／（仔豬總頭數(shù)×天數(shù)）］×100%   1.3.3糞中微生物菌群的測(cè)定：在試驗(yàn)的第14、21天早上收取每頭仔豬排出的新鮮糞樣少許（不低于5g），用無菌塑料袋封裝，選擇仔豬腸道菌群中具有代表性的乳酸桿菌、大腸埃希氏菌及腸球菌，采用平板涂布法進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)［5］。   1.3.4血清免疫指標(biāo)的測(cè)定：試驗(yàn)結(jié)束（第21天）當(dāng)天的8：00，每重復(fù)選取1頭仔豬，前腔靜脈采血10mL，用于測(cè)定血清生化指標(biāo)。血樣于37℃靜置0.5h，3000r/min離心10min，分離血清，用于測(cè)定血清IgG、IgM、IgA、血清總蛋白（TP）及血清尿素氮（SUN），血清免疫球蛋白采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定，血清總蛋白（TP）及血清尿素氮（SUN）采用全自動(dòng)生化測(cè)定儀（卓越330）測(cè)定。   1.3.5糞便中分泌型IgA的測(cè)定：在試驗(yàn)的第14和21天，每重復(fù)隨機(jī)取1頭斷奶仔豬的新鮮糞便，采用豬分泌型免疫球蛋白A（SIgA）ELISA試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）測(cè)定糞便中的SIgA。   1.3.6糞便中消化酶的測(cè)定：分別于試驗(yàn)的第14和21天，每重復(fù)隨機(jī)采集1頭斷奶仔豬的新鮮糞便，測(cè)定其蛋白酶及淀粉酶的活性。采用福林酚試劑法［6］測(cè)定蛋白酶活性，1個(gè)蛋白酶活力單位為pH值為7.5、酪蛋白濃度為10mg/mL。37℃下保溫10min，每分鐘產(chǎn)生1μg酪氨酸的酶量，以U/g表示。采用淀粉-碘顯色法［6］測(cè)定淀粉酶活性，1個(gè)淀粉酶活力單位為pH值6.0、60℃下保溫5min，每小時(shí)液化1mg可溶性淀粉的酶量，以U/g表示。   2結(jié)果與分析   2.1肽菌素對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響   由表1可知，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2與對(duì)照組相比，日增重和日采食量分別提高了22.5%、15.5%和12.9%、10.1%，差異顯著（P＜0.05）；料肉比分別降低了7.87%［差異顯著（P＜0.05）］、4.49%［差異不顯著（P＞0.05）］。   2.2肽菌素對(duì)仔豬腹瀉率的影響   由圖1可知，在第1周內(nèi)，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2的腹瀉率均高于對(duì)照組，特別是試驗(yàn)組2的腹瀉率接近12%；在第2周內(nèi)，腹瀉率與第1周相比均呈下降趨勢(shì)，并且試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2的下降幅度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對(duì)照組；在第3周內(nèi)，對(duì)照組的腹瀉率較第2周有所上升，且均高于試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2的腹瀉率與第2周相比呈下降趨勢(shì)，且試驗(yàn)組2低于試驗(yàn)組1。由試驗(yàn)期的觀察可知，在試驗(yàn)前期，試驗(yàn)組1的腹瀉率與對(duì)照組相差不大，試驗(yàn)組2稍高于對(duì)照組，而中后期試驗(yàn)組的腹瀉較輕，對(duì)照組的腹瀉較為嚴(yán)重。結(jié)果表明，微生態(tài)制劑肽菌素對(duì)于減輕仔豬的腹瀉癥狀有明顯的作用。#p#分頁標(biāo)題#e#   2.3肽菌素對(duì)糞中微生物菌群的影響   由表2可知，在14d時(shí)，試驗(yàn)組1與試驗(yàn)組2的乳桿菌數(shù)分別高出對(duì)照組1.08%和2.04%，糞腸球菌數(shù)分別高出對(duì)照組0.77%和1.92%，差異均不顯著（P＞0.05），大腸桿菌數(shù)比對(duì)照組低5.87%、7.02%，均差異顯著（P＜0.05）；在21d時(shí)，試驗(yàn)組1與試驗(yàn)組2的乳桿菌數(shù)分別高出對(duì)照組4.18%和4.79%，均差異顯著（P＜0.05），糞腸球菌數(shù)分別高出對(duì)照組1.72%（P＜0.05）、2.51%（P＜0.05），大腸桿菌數(shù)分別比對(duì)照組低6.68%、7.84%，均差異顯著（P＜0.05）。   2.4肽菌素對(duì)仔豬血清免疫指標(biāo)的影響   由表3可以看出，對(duì)IgG來說，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2均高于對(duì)照組，分別比對(duì)照組提高了18.5%、22.4%，均差異顯著（P＜0.05）；對(duì)IgM來說，試驗(yàn)組有提高的趨勢(shì)，但差異不顯著（P＞0.05）；對(duì)IgA來說，基本無變化。對(duì)總蛋白來說，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2分別比對(duì)照組提高了9.46%（P＜0.05）、7.21%（P＞0.05）；對(duì)血清尿素氮來說，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2分別比對(duì)照組降低了22.9%、25.1%，均差異顯著（P＜0.05）。   2.5肽菌素對(duì)仔豬糞便中分泌型IgA的影響   由表4可以看出，在14d時(shí)，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2分別比對(duì)照組提高了27.8%、30.6%，均差異顯著（P＜0.05）；在21d時(shí)，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2分別比對(duì)照組提高了33.0%、30.1%，均差異顯著（P＜0.05）。   2.6肽菌素對(duì)仔豬糞便中消化酶的影響   由表5可以看出，在14d時(shí)，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2的蛋白酶分別比對(duì)照組提高了84.0%、99.3%，均差異極顯著（P＜0.01），淀粉酶分別提高了3.98%、7.65%，但差異不顯著（P＞0.05）；在21d時(shí)，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2的蛋白酶分別比對(duì)照組提高了77.4%、91.2%，均差異極顯著（P＜0.01），淀粉酶分別提高了13.1%、14.3%，但差異不顯著（P＞0.05）。   3討論   3.1肽菌素對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響   上述試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組2的仔豬平均日增重比對(duì)照組提高了22.5%和12.9%，料肉比降低了7.87%和4.49%，這與武英等［7］報(bào)道的結(jié)果一致。即肽菌素在斷奶仔豬飼料中使用時(shí)，對(duì)增重和飼料利用率的提高有良好的促進(jìn)作用，其原因是由于肽菌素可以改善仔豬胃腸道的微生態(tài)環(huán)境，從而保證動(dòng)物對(duì)飼料具有良好的消化和利用效率，并獲得良好的飼養(yǎng)效果。該試驗(yàn)結(jié)果表明，在飼料中添加肽菌素能夠促進(jìn)斷奶仔豬的生長發(fā)育，提高日增重，降低飼料增重比。   3.2肽菌素對(duì)斷奶仔豬腹瀉率的影響   斷奶仔豬腹瀉的發(fā)生大都是由于特定原因引起腸道菌群失調(diào)，致病菌大量增殖，有益菌減少，最終導(dǎo)致腹瀉。進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)的益生菌可通過定植繁殖來維持消化道有益菌的優(yōu)勢(shì)作用，并與有害菌競(jìng)爭(zhēng)營養(yǎng)物質(zhì)來維持微生物區(qū)系的平衡，從而提高機(jī)體的抗應(yīng)激能力［8］。該試驗(yàn)結(jié)果表明，在飼料中添加肽菌素能夠有效防治仔豬的腹瀉。   3.3肽菌素對(duì)斷奶仔豬糞中微生物菌群的影響   乳桿菌等益生菌是動(dòng)物腸道中的優(yōu)勢(shì)菌種，它能在腸道中迅速生長繁殖，產(chǎn)生大量酸，使腸道的pH值和Eh下降，既可抑制病原微生物的生長繁殖，又能促進(jìn)腸道中其他厭氧菌的生長繁殖。腸道中的酸性環(huán)境，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，也有利于提高飼料利用率。仔豬出生后盡早攝入乳酸菌等益生菌可以幫助其腸道中盡早形成優(yōu)勢(shì)乳酸菌、雙歧桿菌等菌群，有助于動(dòng)物提高抵抗力，避免外來有害細(xì)菌的感染。該試驗(yàn)結(jié)果表明，肽菌素能明顯促進(jìn)仔豬糞便中乳桿菌等厭氧菌的增殖，并且能抑制腸道內(nèi)需氧菌大腸桿菌的繁殖。   3.4肽菌素對(duì)血清免疫指標(biāo)的影響   該試驗(yàn)結(jié)果表明，添加肽菌素能顯著提高血清IgG的水平（P＜0.05），但對(duì)其他免疫球蛋白影響較小或無顯著影響。這與吳石金等［9］在北京鴨上的研究結(jié)果一致。其機(jī)理可能是微生態(tài)制劑中的有益微生物菌群在體內(nèi)的活動(dòng)大大地改善了機(jī)體有益菌生長的內(nèi)環(huán)境，各種有益微生物在代謝過程中同時(shí)產(chǎn)生大量的生理活性物質(zhì)，如超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）［10］等，增強(qiáng)了機(jī)體的生理機(jī)能，從而提高機(jī)體的體液免疫的水平。血清總蛋白是多種蛋白質(zhì)的混合物，有營養(yǎng)、運(yùn)輸及參與機(jī)體免疫等功能，同時(shí)有利于維持機(jī)體的代謝，一定程度上反映機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝狀況和營養(yǎng)狀況。同時(shí)尿素作為蛋白質(zhì)和氨基酸在哺乳動(dòng)物體內(nèi)的代謝終產(chǎn)物，對(duì)照組仔豬血清尿素含量比試驗(yàn)組高，說明進(jìn)入對(duì)照組仔豬體內(nèi)的蛋白質(zhì)和氨基酸有更多被轉(zhuǎn)化為尿素而損失，因此，可以這樣認(rèn)為肽菌素有利于提高仔豬對(duì)蛋白質(zhì)和氨基酸的利用。其機(jī)理可能是微生態(tài)制劑有利于飼料氨基酸的平衡性吸收，使進(jìn)入機(jī)體的各種氨基酸的組成與機(jī)體的需要更一致，更有利于合成動(dòng)物機(jī)體的蛋白質(zhì)。   3.5肽菌素對(duì)仔豬糞便中分泌型IgA的影響   動(dòng)物腸道與外界環(huán)境相通，長期與大量的病原微生物接觸，因此，為了抵抗病原體的感染，黏膜免疫系統(tǒng)構(gòu)成了機(jī)體抵抗病原體入侵的第一道屏障［11］，黏膜相關(guān)淋巴組織主要部位是腸道相關(guān)淋巴組織（GALT），且GALT是構(gòu)成這道屏障的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，而黏膜免疫的主要效應(yīng)因子是分泌型免疫球蛋白A（SIgA）。消化道黏膜表面定植、生長的大量的有益菌，則是黏膜免疫系統(tǒng)中的重要組成部分。益生菌可維持健康的胃腸道微生態(tài)平衡，有助于黏膜免疫正確區(qū)分病原體和潛在過敏性抗原并加以清除，促進(jìn)SIgA分泌。   3.6肽菌素對(duì)仔豬糞便中消化酶的影響   國內(nèi)許多研究認(rèn)為微生態(tài)制劑具有消化酶活性［12-14］。該試驗(yàn)中試驗(yàn)組斷奶仔豬糞便中中性蛋白酶活性明顯高于對(duì)照組，淀粉酶活性較對(duì)照組也有所提高，可能是由于所添加的芽胞桿菌、乳酸菌等益生菌刺激動(dòng)物腸道，或是由于動(dòng)物長期食用添加含益生菌的飼料而引起的腸道的適應(yīng)性分泌而導(dǎo)致的，或者是某些益生菌本身所產(chǎn)生的胞外酶所致［15］，這是肽菌素促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物生長的重要因素之一。#p#分頁標(biāo)題#e#   4結(jié)論   該試驗(yàn)結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加適量的肽菌素能夠促進(jìn)斷奶仔豬的生長發(fā)育，提高飼料的吸收利用率和轉(zhuǎn)化率，可有效防治仔豬的腹瀉，提高斷奶仔豬的免疫力，是目前飼用抗生素的理想替代品，并為人類獲得健康安全的食品，開辟了新的途徑。